當(dāng)Arie Belldegrun和David Chang全面接手輝瑞(Pfizer)所有的現(xiàn)成(off the shelf)CAR-T療法研發(fā)管線時，他們強調(diào)了與Cellectis的合作項目，可能會使Allogene Therapeutics走上商業(yè)化的道路。
令人振奮的是，兩個月后，Cellectis緊接著又開發(fā)了一種更安全的下一代嵌合抗原受體(CAR)構(gòu)建體，現(xiàn)已定位于臨床應(yīng)用。這種新型CAR-T將治療效果與保護措施相結(jié)合，可能為通過供體細胞制成的“同源”CAR-Ts鋪平道路，并且能夠以現(xiàn)貨(off the shelf)的方式出售。
近日，這項由Cellectis和輝瑞共同參與的研究發(fā)表在Nature旗下的《Scientific Reports》期刊上，論文中報道了這款集合了抗癌效力、安全性“自殺開關(guān)”以及純化和檢測能力的一體化CAR架構(gòu)，且使用Rituxan(利妥昔單抗，rituximab)在體外和體內(nèi)均能夠有效的耗盡大部分的CAR-T細胞。
關(guān)于自殺開關(guān)這個概念，業(yè)內(nèi)人士早已耳熟能詳。從理論上來說，CAR-T細胞是一種可以留在患者體內(nèi)多年的活性藥物，考慮到CAR-T眾所周知的安全性問題——例如細胞因子釋放綜合征(CRS)和神經(jīng)毒性(NT)，緊急開關(guān)已經(jīng)上升到“救命稻草”這個級別了。
創(chuàng)新團隊負責(zé)人Julien Valton表示，Cellectis在這里取得的重大成就是將安全機制和其他理想品質(zhì)結(jié)合在一個分子中，這使得CubiCAR與目前臨床中大多數(shù)的自殺開關(guān)區(qū)別開來，而CAR和開關(guān)處于不同分子中，會導(dǎo)致兩者之間潛在的不平衡性。
他說：“有時候，我們看到了CAR表達，卻看不到自殺開關(guān)。”
自Cellectis在三年前提出該項目以來，輝瑞一直參與該項目，為Valton的團隊提供了針對多發(fā)性骨髓瘤的以BCMA為靶點的CAR，該產(chǎn)品現(xiàn)在屬于Allogene公司，目前，其正在與Cellectis合作開發(fā)該結(jié)構(gòu)的臨床應(yīng)用。與此同時，Cellectis也將CubiCAR結(jié)構(gòu)用于他們自己的CAR中，包括以CD123、CD22和其他抗原為靶點的CAR-T細胞療法。
另外，Bellicum和Autolus等公司也在致力于追求更好、更安全的細胞療法，第一步瞄準血液癌癥，最終的理想化狀態(tài)是能夠有效治療實體瘤。其中Cellectis在研的CubiCAR自殺開關(guān)需要被抗體激活，但其他公司大都選擇了小分子介導(dǎo)的方法。其中之一就是Poseida Therapeutics，其首席執(zhí)行官Eric Ostertag告訴C＆EN，抗體介導(dǎo)的開關(guān)可能需要數(shù)天時間才能真正起作用。
對此，Valton說：“在體外實驗中，使用臨床劑量的利妥昔單抗(rituximab)后，大約15分鐘就能夠耗盡絕大部分的Safeguard CAR-T細胞。且該動力學(xué)數(shù)據(jù)與文獻中使用ICaspase9和RQR8自殺開關(guān)獲得的數(shù)據(jù)一致。但沒有真正的方法能夠衡量它，直到該療法在人體內(nèi)進行測試。”
此外，Valton還補充道，CubiCAR也可以通過QBEND10(CD34抗體)進行細胞檢測和純化，這意味著可以有效提取活性成分。
論文中詳述了這種被稱為CubiCAR的三功能CAR架構(gòu)。實驗過程中，為了確定最佳的安全CAR體系結(jié)構(gòu)，研究人員裝配了14種不同的含有1、2或3種CD20模擬表位的構(gòu)建體，都是非免疫原性的并且對利妥昔單抗結(jié)合具有特異性。這些模擬表位被移植到第二代CAR構(gòu)建體(靶向BCMA抗原)的細胞外部分的不同位置。
此外，研究人員還組裝了另外兩個含有人CD34表位的構(gòu)建體，以允許有效的細胞富集。出于生產(chǎn)量的考慮，所有構(gòu)建體首先作為mRNA在原代T細胞中轉(zhuǎn)染，并在轉(zhuǎn)染后的一天內(nèi)篩選其在T細胞表面表達的能力，以允許利妥昔單抗消耗并刺激其抗腫瘤活性。
在小鼠模型中，研究結(jié)果顯示：CubiCAR和CAR-T細胞都能夠發(fā)揮有效的抗腫瘤作用。其中，在接受CubiCAR-T細胞治療的小鼠中，注射利妥昔單抗可以有效耗盡CAR-T細胞，反之，而未修飾的CAR-T細胞則不受影響(CubiCAR可用于純化，追蹤和消除CAR-T細胞)。
Cellectis的首席科學(xué)家Philippe Duchateau在一份聲明中表示，CubiCAR結(jié)構(gòu)不僅集成了緊湊的安全保護裝置，可快速高效地消耗CAR-T細胞，而且還兼容針對不同靶標(biāo)設(shè)計的多個scFvs，從而使其具備獨特的潛力，使CAR T-細胞免疫療法更安全。”
Allogene的首席科學(xué)家Barbra Sasu博士在一份聲明中表示：“自體CAR-T療法治療血液癌癥的變革性影響已經(jīng)確定?，F(xiàn)如今，我們計劃評估這種CubiCAR方法和其他新型CAR-T療法，這是我們和Cellectis合作開發(fā)的擴大的CAR-T研發(fā)管線。”
另外，波士頓大學(xué)的研究人員也在開發(fā)一種一體化(all-in-one)的方法，他們稱之為SUPRA CAR。這是一種分離的、通用的和可編程的CAR系統(tǒng)，旨在解決CAR-T細胞治療的安全性、特異性和患者復(fù)發(fā)問題。使用適配器分子，研究人員能夠控制T細胞激活的強度，或在體外完全關(guān)閉它。目前，該團隊正在與合成生物學(xué)公司Senti Biosciences合作，將他們的發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化為到臨床上去。(生物谷Bioon.com）