MALDI-TOF MS（Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight Mass Spectrometry）即基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜，作為一種新型的軟電離生物質(zhì)譜技術(shù)，被越來越多的應(yīng)用于生命科學(xué)等領(lǐng)域的多個學(xué)科，不僅具有靈敏度高、準(zhǔn)確度高且易于自動化等優(yōu)勢。
目前，MALDI-TOF MS在食源性監(jiān)測及科研等中的應(yīng)用日益增多，也被臨床實(shí)驗(yàn)室逐漸所采納，同時，MALDI-TOF MS檢測的快速、對急性病例或特殊病原菌的準(zhǔn)確檢測及其在耐藥方面的應(yīng)用使其擁有更好的發(fā)展前景。目前，應(yīng)用傳統(tǒng)的化學(xué)方法對常見細(xì)菌進(jìn)行鑒定，仍然是現(xiàn)在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室所采取的鑒定方法，如革蘭氏染色、氧化酶等生化反應(yīng)，或者是采用梅里埃公司的API和Vitek鑒定系統(tǒng)。但是對于一些難鑒定菌及培養(yǎng)要求苛刻的病原體，常規(guī)鑒定方法并不能滿足實(shí)驗(yàn)室及臨床的應(yīng)用。然而，MALDI-TOF MS技術(shù)不僅能夠快速鑒定，而且也為微需氧菌、厭氧菌、真菌、結(jié)核分枝桿菌及病毒等難鑒定、難培養(yǎng)病原體的鑒定彌補(bǔ)了生化鑒定方面的不足。
MALDI-TOF MS的基本原理
1 MALDI-TOF MS的組成
儀器主要由兩部分組成：基質(zhì)輔助激光解吸電離離子源（MALDI）、飛行時間質(zhì)量分析器（TOF）。
2 MALDI-TOF MS的工作原理
基于不同的微生物具有不同的蛋白質(zhì)譜圖，而MALDI-TOF MS可電離相對分子質(zhì)量為100~1000000的生物分子，電離后不同的離子又具有不同的質(zhì)荷比，質(zhì)譜也能找出種間和株間特異保守峰作為生物標(biāo)記從而將其區(qū)分開，所以MALDI的具體原理是用激光照射樣品與基質(zhì)形成的共結(jié)晶薄膜，基質(zhì)從激光中吸收能量傳遞給生物分子，而電離過程中將質(zhì)子轉(zhuǎn)移到生物分子或從生物分子得到質(zhì)子，從而使生物分子電離，適用于混合物及生物大分子的測定。而TOF的原理是離子在電場作用下加速飛過飛行管道，根據(jù)到達(dá)檢測器的飛行時間不同而被檢測，即測定離子的質(zhì)荷比（M/Z）與離子的飛行時間成正比檢測離子。根據(jù)檢測的結(jié)果與數(shù)據(jù)庫中的參考圖譜進(jìn)行比對，從而得到結(jié)果。
質(zhì)譜目前仍存在的缺陷
MALDI-TOF MS技術(shù)利用自己獨(dú)特的優(yōu)勢，在多個領(lǐng)域都起到了至關(guān)重要的作用，然而，由于技術(shù)的不夠完善及臨床要求的不斷提高，MALDI-TOF MS的缺陷也一一顯現(xiàn)出來。
1 成本高
作為一項(xiàng)新技術(shù)，MALDI-TOF MS雖在多個領(lǐng)域都顯示出它的優(yōu)勢，然而最初的儀器成本高是我們不得不接受的事實(shí)，這就使一些臨床機(jī)構(gòu)望而卻步。
2 對樣本的前處理要求高
由于MALDI-TOF MS技術(shù)的原理是基于不同的蛋白質(zhì)譜圖，所以需要純培養(yǎng)或單個菌落，這就為難培養(yǎng)病原體提出了新的挑戰(zhàn)，也增加了標(biāo)本的前處理難度。而且MALDI-TOF MS也不能將蛋白表達(dá)相近的細(xì)菌區(qū)分，為臨床對不同菌種的鑒定提出了挑戰(zhàn)。
3 數(shù)據(jù)庫尚需完善
臨床的需求不斷增加，現(xiàn)有的數(shù)據(jù)庫并不能滿足臨床的需求，對一些不常見病原體，MALDI-TOF MS缺乏相應(yīng)的數(shù)據(jù)庫，因此我們需要去豐富現(xiàn)有數(shù)據(jù)庫，增加一些罕見菌的質(zhì)譜圖來滿足臨床的需要。
4 目前主要集中于定性
基于MALDI-TOF MS技術(shù)的原理，我們只能對病原體做到定性，很難做到定量。雖然在抗生素耐藥方面我們已經(jīng)取得了一定的成效，但是對抗生素耐藥性的檢測能力有限。而且作為一項(xiàng)新技術(shù)對于報告結(jié)果的驗(yàn)證和解釋缺乏統(tǒng)一的實(shí)用性的操作手冊，因此仍我們要求在以后的科研和工作中不斷去鉆研去完善。
（文章來源：檢驗(yàn)視界網(wǎng)）