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CIK細胞是英文Cytokine Induced Killer Cell的簡稱,中文名為細胞因子誘導(dǎo)的殺傷細胞,是將人體外周血單個核細胞(PBMC)在體外模擬人體內(nèi)環(huán)境,用多種細胞因子共同培養(yǎng)增殖后獲得的一群 異質(zhì)細胞,它具有顯著的識別和殺傷人體各種腫瘤細胞和病毒的活性,其中CD3+CD56+細胞是CIK細胞群體中主要的效應(yīng)細胞,兼具有 T 淋巴細胞強大的抗瘤活性和 NK 細胞的非 MHC 限制性殺瘤優(yōu)點,因此又被稱為具有NK細胞作用的T淋巴細胞。

(1) CIK細胞能以不同的機制識別腫瘤細胞,通過直接的細胞質(zhì)顆粒穿透封閉的腫瘤細胞膜進行胞吐,釋放穿孔素、顆粒酶,實現(xiàn)對腫瘤細胞的裂解達到直接殺傷的作用;

(2) CIK細胞能分泌IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-6等多種細胞因子,部分因子具有直接對腫瘤抑制作用;

(3) CIK細胞可以通過配體-受體(Fas:FasL)介導(dǎo)的方式誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡;

(4) CIK細胞分泌的細胞因子能顯著刺激初始型T細胞增殖,有效激活機體的免疫系統(tǒng),使之趨于正常,提高病人自身抗腫瘤的能力。

(1) 增殖速度快,殺瘤活性高。

(2) 殺瘤譜廣。

(3) 能抵抗腫瘤細胞引發(fā)的效應(yīng)細胞Fas-FasL凋亡。

(4) 對多重耐藥腫瘤細胞同樣敏感。

(5) CIK細胞殺瘤活性不受CsA(環(huán)孢霉素A)和FK506(普樂可復(fù))等免疫抑制劑的影響。

(6) 對正常骨髓造血前體細胞毒性小。

(7) CIK細胞具有識別腫瘤的機制,特異性強,

(8) 安全性好。CIK對正常的組織細胞無毒性作用,應(yīng)用安全,患者副反應(yīng)小。

DC(Dendritic Cell)細胞即樹突狀細胞,是正常人體內(nèi)存在的一種具有強大的抗原提呈功能的一類特殊的細胞,能夠直接攝取、加工和呈遞抗原,刺激體內(nèi)的初始型T細胞活 化,是機體免疫應(yīng)答的“啟動者”。 通俗講,DC相當于信使,將癌癥的抗原信息傳遞給發(fā)揮免疫效應(yīng)和殺傷功能的效應(yīng)者即T細胞,使其具備特異性殺傷癌癥細胞的能力。

將攜帶癌癥特異性抗原信息的DC加入到CIK培養(yǎng)體系中,一方面DC將癌癥的抗原信息傳遞給CIK細胞群體中的免疫殺傷細胞,使其具備特異性殺傷能力,大幅度提高CIK細胞的殺傷癌癥細胞的能力;另一方面DC釋放的細胞因子能夠促進CIK細胞的增殖,使細胞數(shù)量大幅增加。DCIK在CIK基礎(chǔ)上細胞數(shù)量更多,功能更強大,應(yīng)用于癌癥患者的調(diào)理,明顯提高調(diào)理效果。

絕大多數(shù)經(jīng)DCIK細胞調(diào)理的腫瘤患者均可獲得較好的近期療效,遠期療效如生存率亦較優(yōu)。其療效與患者的分期、病情和其他調(diào)理手段結(jié)合等因素有關(guān),主要體現(xiàn)在以下幾方面:

(1)大部分患者臨床癥狀改善,食欲、體力增加,睡眠、精神狀態(tài)改善,提高生活質(zhì)量,有效率在80%左右;

(2)化療和放療的副作用明顯減輕,提高放療和化療的耐受性,提高放療和化療的療效;

(3)血液中免疫活性細胞數(shù)量增加,細胞表型改變,細胞因子分泌增加,免疫細胞功能顯著提高,并能維持較長時間,同時產(chǎn)生抗腫瘤免疫記憶,有效地改善機體自身抗腫瘤能力;

(4)遠期無轉(zhuǎn)移和無復(fù)發(fā)率明顯高于未使用DCIK細胞的對照組;

(5)生存期明顯延長;

(6)對于沒有機會手術(shù)和復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的晚期腫瘤患者,大量的DCIK細胞回輸能迅速緩解晚期腫瘤患者的癥狀,穩(wěn)定病情,提高患者身體機能狀況,改善生活質(zhì)量,延長生存時間,為其他調(diào)理爭取其它機會;

(7)與手術(shù)、化療和放療及其他治療方法聯(lián)合應(yīng)用提高前者的治療效果,療效在原有基礎(chǔ)上可以再提高20-30%。

DCIK 細胞調(diào)理的安全性也非常好,至今未有嚴重不良反應(yīng)(嚴重的變態(tài)反應(yīng)、肝腎功能損害、骨髓抑制等)的報道。少部分患者可出現(xiàn)一過性類流感樣癥狀,如發(fā)燒、頭 痛、關(guān)節(jié)酸痛,按常規(guī)處理即可,大多可自行緩解。其治療有效性確切,安全性高,副作用極小,在廣泛的臨床應(yīng)用中得到證實。

DCIK細胞既有非MHC限制性的殺傷能力,不受癌癥組織類型的限制,同時,又具備特異性殺傷癌癥細胞的能力,可以廣泛應(yīng)用于各種不同病程及階段實體腫瘤以及血液系統(tǒng)腫瘤的調(diào)理(T細胞淋巴癌/瘤除外)

此外還可應(yīng)用于病毒性肝炎患者(主要是慢性乙型肝炎和丙型肝炎)。

DCIK細胞調(diào)理可用于各個分期的腫瘤患者,根據(jù)患者的病情、病程及治療史,可靈活安排應(yīng)用。以下是部分參考方案:

(1)DCIK+手術(shù)

適用于早期腫瘤患者,手術(shù)后聯(lián)合使用DCIK細胞可降低術(shù)后感染率,有效清除術(shù)后殘余的癌細胞及微小病灶,防止復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移,提高治愈率;

(2)DCIK+微創(chuàng)手術(shù)+放、化療

適用于中晚期腫瘤患者,手術(shù)后發(fā)生轉(zhuǎn)移、或者身體無法承受手術(shù)的患者。微創(chuàng)手術(shù)減輕瘤負荷,放、化療殺死快速生長的小病灶和癌細胞,DCIK細胞清除靜止期的癌細胞、調(diào)節(jié)自體免疫功能對抗癌細胞,阻止或延緩復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。

(3)DCIK+放、化療

適用于中晚期腫瘤患者。DCIK細胞具有協(xié)同調(diào)理作用,可抑制癌細胞耐藥性,提高其對放、化療的敏感性,明顯減輕放、化療的毒副作用,提高患者免疫力。

(4)單獨使用DCIK,為無法接受常規(guī)治療以及拒絕常規(guī)治療的患者提供一種有效的調(diào)理手段;

(5)與其他腫瘤治療方法以及中醫(yī)中藥聯(lián)合。

(6)癌性胸腹水患者,靜脈回輸+胸腹腔注射。

(1)第一次回輸前如有條件應(yīng)對患者外周血淋巴細胞亞群進行檢測如CD3、CD4、CD8、CD4/CD8比值等,在最后一次治療結(jié)束2-4周再采血檢測外周血淋巴細胞亞群。

(2)回輸前、后患者Karnofsky 評分及體重等變化。

(3)回輸前、后(3個月左右)腫瘤影像學(xué)變化,及腫瘤標志物等相關(guān)指標的動態(tài)監(jiān)測。

(4)患者治療前后生命體征與生存質(zhì)量、生存期長短的動態(tài)監(jiān)測。

(5)細胞回輸前后患者不良反應(yīng)的觀察。

(1)手術(shù)、化療、放療聯(lián)合腫瘤免疫細胞療法,可以清除殘余腫瘤細胞,防復(fù)發(fā)、防轉(zhuǎn)移,提升患者生存質(zhì)量和延長生存期;

(2)快速恢復(fù)手術(shù)、化療、放療造成的免疫損傷,提高治療成功率;

(3)減輕化療藥物的免疫抑制作用;

(4)增強放化療耐受性,減少放化療毒副作用;

(5)降低痛苦,提高病人的生存質(zhì)量。

(1)正在使用免疫抑制藥物,或器官移植后長期使用免疫抑制劑的患者;

(2)正在接受化療、放療患者,不能與化療、放療同時應(yīng)用,否則會損失注入的免疫細胞,一般要求間隔1周左右;

(3)嚴重肝、腎功能異常者;

(4)嚴重凝血功能異常者;

(5)近期內(nèi)有因為嚴重凝血功能異常導(dǎo)致活動性出血史者;

(6)嚴重感染未控制或高熱患者;

(7)嚴重的心腦血管疾病、糖尿病患者;

(8)嚴重過敏體質(zhì)者和嚴重自身免疫性疾病患者;

(9)孕婦或哺乳期婦女;

(10)頑固性或持續(xù)性癲癇患者;

(11)T細胞淋巴癌/瘤患者;

(12)HIV陽性患者;

(13)晚期腫瘤患者預(yù)期壽命小于3個月者;

(14)晚期腫瘤患者年齡大于70歲,身體狀況不佳者;

(15)對免疫細胞調(diào)理期望值過高脫離現(xiàn)實者。

(1)細胞輸注過程中,有極少數(shù)病人出現(xiàn)過敏癥狀,如果患者出現(xiàn)嚴重過敏體征,如呼吸困難者,應(yīng)停止細胞輸注調(diào)理,并作相應(yīng)的臨床對癥處理。

(2)細胞輸注結(jié)束后,有部分患者出現(xiàn)發(fā)熱(37.0℃~38.5℃之間)、困乏等一過性流感樣癥狀,絕大部分病人在2~6小時內(nèi)自行恢復(fù)正常。極少數(shù)出現(xiàn)體溫較高,超過39℃,并有可能伴隨寒戰(zhàn)等,一般對癥處理即可恢復(fù)。

(3)細胞調(diào)理過程中還會有5-9%的患者出現(xiàn)輕度肝腎功能損害、心電圖異常、貧血等副反應(yīng),及早發(fā)現(xiàn)及時采取治療措施,可以避免嚴重不良事件的發(fā)生,

綜上所述,免疫細胞調(diào)理雖然較少出現(xiàn)嚴重不良反應(yīng)發(fā)生,但是還是有少數(shù)患者出現(xiàn)一些輕度的副反應(yīng),因此。在調(diào)理過程中要嚴密監(jiān)測不良反應(yīng),出現(xiàn)上述不良反應(yīng)及時治療,保證DCIK細胞調(diào)理的順利進行 

DCIK細胞調(diào)理步驟可概括如下:

(1)申請

醫(yī) 生向患者介紹腫瘤免疫細胞調(diào)理技術(shù),安排患者進行常規(guī)檢查,包括肝功能、腎功能、血常規(guī)、抗凝血項、乙肝、艾滋、梅毒、丙肝病毒、淋巴細胞亞群檢測(流式 細胞儀檢測),對患者腫瘤情況進行臨床檢查評估,排除不適宜進行免疫細胞調(diào)理的情況,患者填寫《知情同意書》,醫(yī)生填寫《調(diào)理申請單》。

(2)采血

根據(jù)患者免疫細胞計數(shù)采集病人50毫升左右的外周血并送往GMP潔凈實驗室。采血時間安排在當天早上進行。采血前一天及當天早上可以進食清淡飲食,避免油膩飲食。

(3)GMP 凈化實驗室培養(yǎng)

分離出單個核細胞后進行培養(yǎng)、誘導(dǎo)。DCIK細胞的培養(yǎng)時間大約12~14天;培養(yǎng)結(jié)束時,使用生理鹽水洗去培養(yǎng)基,并稀釋到目標細胞濃度待用。個別患者由于病情以及進行過長期化療或放療,免疫細胞反應(yīng)性較差,培養(yǎng)時間可能需要延長。

(4)細胞回輸:細胞回輸使用輸血器,通過靜脈滴注,回輸前30分鐘,給患者肌注非那根。具體方法如下:

DCIK細胞于培養(yǎng)的第12-14天開始回輸,一次采血培養(yǎng)一般分3次細胞回輸,可以連續(xù)3天,如有特殊情況也可以間隔1-2天回輸。每個調(diào)理周期為3-5個療程,每個療程間隔時間結(jié)合臨床其他調(diào)理確定,一般間隔2周以上。

伴有癌性胸腹水的患者,可以一半細胞靜脈回輸,另一半細胞胸腹腔注射。

(5)一個調(diào)理周期結(jié)束1個月后進行臨床評估。

(6)根據(jù)評估結(jié)果確定下一個調(diào)理周期的時間。

目 前,腫瘤的治療要想得到良好的治療效果必須采取綜合治療措施,即將現(xiàn)有的治療方法進行優(yōu)化組合,在清除腫瘤組織的同時最大限度地提高患者自身抗腫瘤免疫能 力。保護和提高腫瘤患者的免疫功能在抑制腫瘤發(fā)生發(fā)展和提高治療效果方面起到關(guān)鍵作用,腫瘤免疫細胞調(diào)理將在腫瘤綜合治療中扮演前所未有的決定性角色。腫 瘤調(diào)理過程是一個長期的過程,一般需要5年的時間,也就是說腫瘤病人經(jīng)過治療后五年不復(fù)發(fā)才算臨床治愈。在這五年的康復(fù)治療過程中,將其分為三個階段。第 一階段為腫瘤對抗期;第二階段為腫瘤治療的修復(fù)期;第三階段為腫瘤治療的康復(fù)期。腫瘤免疫細胞療法在腫瘤治療的三個時期作用的特點不同,分別有其獨特的地 位:

腫瘤治療的對抗期一般是指病人確診后入院開始 到手術(shù)、放療、化療完成后半年左右這段時期。腫瘤綜合治療就是在對抗期內(nèi)完成的。人體的免疫功能可以消滅106以下的腫瘤細胞。臨床上診斷出的腫瘤病人其 體內(nèi)腫瘤細胞數(shù)已遠遠超出109。這種情況下僅僅靠免疫調(diào)理是不可能治愈病人的,必須借助手術(shù)、放療、化療等方法才能消除腫瘤塊及浸潤和轉(zhuǎn)移病灶。腫瘤病 人免疫功能都比較低,機體抵抗力基礎(chǔ)差,并隨著疾病的進展病人抗腫瘤能力愈來愈差。所以早、中、晚期病人在某種意義上也預(yù)示著病人免疫抗病基礎(chǔ)狀況。在這 種條件下,不恰當?shù)貙Σ∪诉M行手術(shù)、化療、放療等治療,盡管能夠去除原發(fā)腫瘤、殺滅部分轉(zhuǎn)移的腫瘤細胞,但同時又進一步消弱患者本已經(jīng)虛弱的免疫抗腫瘤能 力,因此,這三種傳統(tǒng)治療方法都是除邪傷本的方法,其治療的副作用使病人免疫力低下,甚至處于衰竭狀況,病人常出現(xiàn)下列情況:病人痛苦增加,生活質(zhì)量更 差;腫瘤迅速復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移、擴散;加速病人的死亡。

此時對病人進行免疫細胞調(diào)理不但可以有效地克服手術(shù),放療、化療副作用,減少病人 痛苦,使綜合治療順利完成,在消除殘存腫瘤細胞及微小轉(zhuǎn)移灶外,同時可使病人自身免疫抗腫瘤能力得到保護和恢復(fù),為治愈疾病打下良好的基礎(chǔ)。對抗期腫瘤免 疫細胞調(diào)理進行得愈早愈好,對于每一個入院治療病人無論早、中、晚期病人,在手術(shù)、放療、化療之前或同時進行免疫細胞調(diào)理,這樣一般都會取得比較好的治療 效果。

病人經(jīng)過醫(yī)院綜合治療出院后的三 年時間定為腫瘤治療的修復(fù)期。這一時期是決定病人治療效果的關(guān)鍵時期,60-70%復(fù)發(fā)的病人都是在這幾年發(fā)生。這是因為病人經(jīng)過對抗期手術(shù)、放療、化療 一系列創(chuàng)傷性治療,免疫力更加低下甚至處于衰竭狀態(tài),同時病人體內(nèi)還存有許多化療、放療不能殺滅的G0期腫瘤細胞,這種細胞此時被激活分裂形成新的病灶。 因此,迅速提高病人的自身抗腫瘤免疫力,才能有效地預(yù)防腫瘤的復(fù)發(fā)。在修復(fù)期進行有效的,正規(guī)的,足量的腫瘤免疫細胞調(diào)理是預(yù)防復(fù)發(fā)有效的方法之一。

腫瘤治療修復(fù)期以后的兩年時間,稱之為腫瘤治療的康復(fù)期,這個時期病人免疫功能已經(jīng)恢復(fù)正常,在對抗期治療中被破壞的正常細胞大部分得到修復(fù),少數(shù)無法修復(fù) 的細胞也凋亡。大多數(shù)G0期腫瘤細胞激活后被人體免疫功能消滅。病人已度過了腫瘤復(fù)發(fā)的高危期。但是這時病人體內(nèi)仍殘存少數(shù)G0期細胞,如果病人免疫力低 下,這少數(shù)G0期細胞仍然是疾病復(fù)發(fā)的根源。因此病人康復(fù)期定期進行腫瘤免疫細胞調(diào)理,是病人免疫功能保持正?;蜉^高水平,取得腫瘤的最終治愈有效方法。

腫瘤細胞是正常機體細胞在各種內(nèi)外因致腫瘤因素作用下發(fā)生惡變產(chǎn)生的,任何引起機體生存外環(huán)境惡化的因素都可以作為外因誘發(fā)體內(nèi)產(chǎn)生瘤細胞。隨著工業(yè)的高度 發(fā)展人類生存環(huán)境日趨惡化,實際上任何人都無法擺脫致腫瘤外因條件的作用,機體隨時都有腫瘤細胞產(chǎn)生,正常機體每天都有3000~6000個腫瘤細胞存 在。人體免疫功能對腫瘤細胞能夠及時識別和消滅作用。

正常的免疫功能能夠消滅機體內(nèi)106以下腫瘤細胞。因此只要機體保持正常免疫功能狀 態(tài),即使每天有3000~6000個腫瘤細胞產(chǎn)生也不會發(fā)生發(fā)展成腫瘤。大部份腫瘤細胞被免疫功能及時發(fā)現(xiàn)、消滅。少部分變成G0期腫瘤細胞,G0期腫瘤 細胞能夠逃避免疫功能監(jiān)視和攻擊而長期在體內(nèi)存在。實際上健康人體內(nèi)存在多少不等腫瘤細胞,這些腫瘤細胞都是以G0期狀態(tài)長期存在。G0期腫瘤細胞在一定 條件下可隨時活化進入分裂期,被免疫功能識別攻擊消滅。只有人體免疫功能下降的條件下,G0期腫瘤細胞才有可能發(fā)展成腫瘤。

人 體內(nèi)腫瘤細胞只有在人體內(nèi)免疫功能降低和其所在局部環(huán)境適合生存的條件下才能分裂發(fā)展成腫瘤。其腫瘤發(fā)展的速度又取決于免疫功能狀況。由一個腫瘤細胞發(fā)展 成原位腫瘤一般需要2~10年時間。這時間長短差異主要取決于病人機體免疫功能的好壞。腫瘤細胞發(fā)展形成腫瘤開始就向周圍浸潤性生長和進入淋巴、血液轉(zhuǎn) 移。轉(zhuǎn)移腫瘤細胞是否能夠發(fā)展形成轉(zhuǎn)移灶也取決于機體的免疫功能好壞和轉(zhuǎn)移局部環(huán)境條件好壞。早期病人免疫功能比較好轉(zhuǎn)移的腫瘤細胞大部分被消滅,少部分 腫瘤細胞以G0期狀態(tài)存在,不形成轉(zhuǎn)移灶。只有病人免疫功能極度低下情況下腫瘤細胞的增殖才能形成轉(zhuǎn)移灶。一般在臨床上先發(fā)現(xiàn)原發(fā)灶,轉(zhuǎn)移灶在治療后才出 現(xiàn)。極少數(shù)病人首先發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移灶,很難發(fā)現(xiàn)原發(fā)病灶,這種情況主要是轉(zhuǎn)移腫瘤細胞生長環(huán)境利于其生長。

腫瘤和機體免疫功能關(guān)系十分復(fù)雜??偲?來講免疫功能降低導(dǎo)致機體腫瘤形成。腫瘤進一步發(fā)展又反過來抑制機體的免疫功能。免疫功能降低,腫瘤的發(fā)展引起病人體內(nèi)內(nèi)環(huán)境平衡失調(diào),并因此引起一系列 并發(fā)癥,最后因多器官功能衰竭死亡。臨床上大多數(shù)腫瘤病人死亡的原因不是腫瘤本身引起的,而是因內(nèi)環(huán)境紊亂,誘發(fā)的一系列并發(fā)癥死亡。

手術(shù)、放療、化療三種治療方法可以清除腫瘤病灶,消滅一定數(shù)量轉(zhuǎn)移瘤細胞和病灶殘余腫瘤細胞,對改變體內(nèi)腫瘤發(fā)展勢力大于免疫功能的這種惡性循環(huán)狀況有一定 積極作用,但是這三種治療方法不可能消滅干凈全部分裂期腫瘤細胞及大部份G0期腫瘤細胞,剩余的細胞就要靠機體正常免疫功能去清除。腫瘤痊愈的實質(zhì)是患者 自愈能力的恢復(fù),如果病人經(jīng)過手術(shù)、放療、化療后免疫功能能夠盡快恢復(fù)至正常,具有比較好的腫瘤細胞殺傷力(ATK),有一定的自愈能力,病人就會取得比 較好的治療效果。腫瘤病人免疫功能本身就比較差,而手術(shù)、放療,化療對病人免疫功能都一定破壞作用,尤其化療破壞作用更嚴重。綜合治療后效果好壞在很大程 度上取決于病人還保留多少自愈能力。故腫瘤病人早、中、晚期區(qū)分,不僅是提示病情、病程早晚,也提示病人機體免疫功能好壞,更預(yù)測治療效果如何。

總之,腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與人體的免疫功能密切相關(guān)。即在正常情況下,腫瘤與機體的防御機能之間處于一種動態(tài)的平衡,而一旦這種平衡被破壞,就可能發(fā)生腫瘤。 身體各組織細胞受到外界化學(xué)、物理、生物等因素刺激或自身細胞衰老變異等因素的影響,使得體內(nèi)某些細胞發(fā)生突變,成為癌前細胞;而機體免疫功能低下或者由 于免疫異常,無法及時識別、殺傷、清除這些異常細胞,突變細胞在組織內(nèi)復(fù)制生長,達到一定數(shù)量后破壞器官功能,腫瘤即發(fā)生。腫瘤患者,尤其是惡性腫瘤病人 往往免疫功能、特別是細胞免疫功能低下,因而疾病呈進展、活動、預(yù)后差。因此,提高機體免疫力,建立有效的免疫應(yīng)答是治療腫瘤最有希望的途徑。

 

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